摘要目的:观察脂肪源性干细胞(ADSC)联合脱细胞支架(AS)对坐骨神经损伤(SNI)大鼠脊神经节超微结构和睫状神经营养因子(CNTF)、Janus激酶2(JAK2)、磷酸化JAK2(p-JAK2)、信号转导与转录激活因子3(STAT3)和磷酸化STAT3(p-STAT3)蛋白及mRNA表达的影响,阐明ADSC联合AS对SNI大鼠脊神经节的保护作用及其可能机制.方法:分离培养大鼠ADSC并检测其多向分化潜能.制备大鼠AS,将ADSC注入至AS中构建组织工程神经.36只大鼠随机分为对照组、模型组、AS组和ADSC+AS组.对照组大鼠常规饲养,不进行任何处理,其余各组大鼠采用切除右侧坐骨神经10 mm的方法建立SNI模型,模型组不再处理,AS组和ADSC+AS组大鼠分别将AS和构建的组织工程神经桥接于损伤神经的两断端处.术后 6周,采用透射电镜观察各组大鼠脊神经节超微结构,免疫荧光法检测各组大鼠脊神经节中CNTF、p-JAK2和p-STAT3蛋白表达水平,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测各组大鼠脊髓神经节中CNTF、JAK2和STAT3 mRNA表达水平.结果:原代ADSC培养7 d,倒置显微镜下可见数量较多、体积较大且呈长梭形的细胞,类似簇状或旋涡状排列;油红O染色镜下可见细胞中红色的脂滴,茜素红染色镜下可见钙化结节,表明分离培养的细胞具有多向分化能力.与正常神经组织比较,大鼠AS中DNA水平明显出降低(P<0.05).与对照组比较,模型组大鼠脊神经节中细胞核膜凹凸不平,呈锯齿状改变,胞质内细胞器数目减少,线粒体肿胀、嵴断裂或缺失,结构不清晰;CNTF蛋白和mRNA表达水平均明显降低(P<0.01),p-JAK2和p-STAT3蛋白表达水平均明显升高(P<0.01),JAK2和STAT3 mRNA表达水平均明显升高(P<0.01).与模型组比较,AS组大鼠脊神经节中细胞核膜锯齿状改变明显减轻,胞质中细胞器数量增加,线粒体肿胀减轻;ADSC+AS组大鼠脊神经节中细胞核膜趋向完整,细胞器数量增加,线粒体肿胀和空泡化明显减轻;AS组和ADSC+AS组大鼠脊神经节中CNTF蛋白和mRNA表达水平均明显升高(P<0.01),p-JAK2和p-STAT3 蛋白表达水平均明显降低(P<0.01),JAK2 和STAT3 mRNA表达水平明显降低(P<0.01).与AS组比较,ADSC+AS组大鼠脊神经节中CNTF蛋白和mRNA表达水平均明显升高(P<0.05或P<0.01),p-JAK2和p-STAT3蛋白表达水平均明显降低(P<0.01),JAK2和STAT3 mRNA表达水平明显降低(P<0.01).结论:ADSC联合AS应用可改善SNI大鼠脊神经节超微结构,其机制可能与ADSC联合AS应用可增加脊神经节中CNTF表达、降低JAK2/STAT3信号通路活化有关.