摘要目的:探讨上游转录因子2(USF2)对脓毒症大鼠凝血功能障碍的影响,并基于蛋白质酪氨酸磷酸酶非受体型2(PTPN2)/c-Jun氨基末端激酶(JNK)/甾醇调节元件结合蛋白2(SREBP2)信号通路分析其潜在的作用机制.方法:从265只健康SD大鼠中随机选取15只作为对照组(不结扎不穿刺),剩余250只大鼠采用盲肠结扎穿刺(CLP)法构建脓毒症模型.将造模成功的75只大鼠随机分为模型组(CLP)、阳性药物组(CLP+20 mg·kg-1 辛伐他汀)、小干扰RNA(siRNA)阴性对照(si-NC)组(CLP+转染si-NC)、si-USF2 组(CLP+转染USF2-siRNA)和JNK激活剂组(CLP+转染USF2-siRNA+2 mg·kg-1 JNK激活剂Anisomycin),每组15只.采用自动血细胞计数器分析仪评估各组大鼠血小板(PLT)计数;自动凝血分析仪测定各组大鼠凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)和凝血酶时间(TT)以及D-二聚体(DD)和纤维蛋白原(FIB)水平;酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测各组大鼠血清中白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、C反应蛋白(CRP)和降钙素原(PCT)等炎性因子水平;采用试剂盒检测各组大鼠血清中超氧化物歧化酶(SOD)活性以及丙二醛(MDA)和谷胱甘肽(GSH)水平;HE染色观察各组大鼠肺组织和盲肠组织病理形态表现;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和Western blotting法检测各组大鼠肺组织和盲肠组织中USF2 mRNA和蛋白表达水平以及PTPN2、磷酸化JNK(p-JNK)、JNK和SREBP2蛋白表达水平.结果:造模12 d后,对照组大鼠生存率明显高于模型组.与对照组比较,模型组、阳性药物组、si-NC组、si-USF2组和JNK激活剂组大鼠肺组织及盲肠组织中USF2 mRNA和蛋白表达水平明显升高(P＜0.05);与模型组和si-NC组比较,si-USF2组和JNK激活剂组大鼠肺组织及盲肠组织中USF2 mRNA和蛋白表达水平明显降低(P＜0.05).与对照组比较,模型组、阳性药物组、si-NC组、si-USF2 组和JNK激活剂组大鼠PLT计数明显降低(P＜0.05);与模型组比较,阳性药物组、si-USF2组和JNK激活剂组大鼠PLT计数明显升高(P＜0.05);与si-NC组比较,si-USF2组和JNK激活剂组大鼠PLT计数明显升高(P＜0.05);与si-USF2组比较,JNK激活剂组大鼠PLT计数明显降低(P＜0.05).与对照组比较,模型组、阳性药物组、si-NC组、si-USF2组和JNK激活剂组大鼠APTT、PT和TT及DD水平明显升高(P＜0.05),FIB水平明显降低(P＜0.05);与模型组比较,阳性药物组、si-USF2组和JNK激活剂组大鼠APTT、PT和TT及DD水平明显降低(P＜0.05),FIB水平明显升高(P＜0.05);与si-NC组比较,si-USF2组和JNK激活剂组大鼠APTT、PT和TT及DD水平明显降低(P＜0.05),FIB水平明显升高(P＜0.05);与si-USF2组比较,JNK激活剂组大鼠APTT、PT和TT及DD水平明显升高(P＜0.05),FIB水平明显降低(P＜0.05).与对照组比较,模型组、阳性药物组、si-NC组、si-USF2组和JNK激活剂组大鼠血清中IL-1β、IL-6、TNF-α、CRP、PCT和MDA水平均明显升高(P＜0.05),SOD活性和GSH水平明显降低(P＜0.05);与模型组比较,阳性药物组、si-USF2组和JNK激活剂组大鼠血清中IL-1β、IL-6、TNF-α、CRP、PCT和MDA水平明显降低(P＜0.05),SOD活性和GSH水平明显升高(P＜0.05);与si-NC组比较,si-USF2组和JNK激活剂组大鼠血清中IL-1β、IL-6、TNF-α、CRP、PCT及MDA水平明显降低(P＜0.05),SOD活性和GSH水平明显升高(P＜0.05);与si-USF2组比较,JNK激活剂组大鼠血清中IL-1β、IL-6、TNF-α、CRP、PCT和MDA水平明显升高(P＜0.05),SOD活性和GSH水平明显降低(P＜0.05).与对照组比较,模型组大鼠肺组织肺泡结构被破坏,盲肠组织绒毛消失,大量炎性细胞浸润;与模型组比较,阳性药物组、si-USF2组和JNK激活剂组大鼠肺组织肺泡破坏程度及盲肠组织绒毛损坏程度减轻,炎性细胞浸润减少;与si-NC组比较,si-USF2组和JNK激活剂组大鼠肺组织和盲肠组织上述病理变化程度明显减轻;与si-USF2组比较,JNK激活剂组大鼠肺组织和盲肠组织上述病理变化加重.与对照组比较,模型组、阳性药物组、si-NC组、si-USF2组和JNK激活剂组大鼠肺组织和盲肠组织中SREBP2蛋白表达水平及p-JNK/JNK比值明显升高(P＜0.05),PTPN2蛋白表达水平明显降低(P＜0.05);与模型组比较,阳性药物组、si-USF2组和JNK激活剂组大鼠肺组织和盲肠组织中SREBP2 蛋白表达水平及p-JNK/JNK比值明显降低(P＜0.05),PTPN2蛋白表达水平明显升高(P＜0.05);与si-NC组比较,si-USF2组和JNK激活剂组大鼠肺组织及盲肠组织中SREBP2蛋白表达水平和p-JNK/JNK比值明显降低(P＜0.05),PTPN2蛋白表达水平明显升高(P＜0.05);与si-USF2组比较,JNK激活剂组大鼠肺组织和盲肠组织中SREBP2蛋白表达水平及p-JNK/JNK比值明显升高(P＜0.05),PTPN2蛋白表达水平明显降低(P＜0.05).结论:敲低USF2基因能够明显改善脓毒症大鼠的肺部和盲肠组织病理形态,缓解凝血功能障碍,并降低机体炎性因子和氧化应激水平,其作用机制可能与其调控PTPN2/JNK/SREBP2信号通路有关.