摘要目的:探讨柴芪益肝方(CQ)通过激活核因子κB(NF-κB)信号通路调控巨噬细胞极化对肝癌HepG2细胞恶性生物学行为的抑制作用,为CQ应用于肝癌的治疗提供理论依据.方法:制备含CQ血清,稀释后浓度为2.5％、5.0％、10.0％、20.0％和30.0％.采用细胞计数试剂盒8(CCK-8)法检测含CQ血清作用后各组RAW264.7细胞和HepG2细胞活力,酶联免疫吸附测定(ELISA)试剂盒检测含CQ血清作用后各组RAW264.7细胞上清中白细胞介素(IL)-6和IL-10水平,筛选CQ最佳处理浓度.建立RAW264.7和HepG2细胞共培养体系,并构建HepG2细胞移植瘤裸鼠模型,将共培养细胞和荷瘤小鼠分别随机分为对照组、CQ组、NF-κB抑制剂二硫代氨基甲酸吡咯烷(PDTC)组和CQ+PDTC组.采用CCK-8法和Transwell小室实验分别检测各组HepG2细胞活性、迁移细胞数和侵袭细胞数.测定各组裸鼠移植瘤体积和质量.采用流式细胞术检测各组共培养体系下RAW264.7细胞和裸鼠肿瘤组织中巨噬细胞M1和M2型极化情况;ELISA法检测各组共培养体系下RAW264.7细胞上清和裸鼠血清中M1型细胞因子IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)以及M2型细胞因子转化生长因子β(TGF-β)、精氨酸酶1(Arg-1)和IL-10水平,Western blotting法检测各组共培养体系下 RAW264.7 细胞和裸鼠血清中 NF-κB通路相关蛋白 NF-κB抑制蛋白α(IκB-α)、磷酸化IκB-α(p-IκB-α)、NF-κB p65及p-NF-κB p65表达水平.结果:与对照组比较,CQ组HepG2细胞活力、迁移细胞数和侵袭细胞数明显降低(P<0.05),PDTC组HepG2细胞活性、迁移细胞数和侵袭细胞数明显升高(P<0.05);与CQ组比较,CQ+PDTC组HepG2 细胞活性、迁移细胞数和侵袭细胞数明显升高(P<0.05).与对照组比较,CQ组裸鼠移植瘤体积和质量均明显降低(P<0.05),PDTC组裸鼠移植瘤体积和质量明显升高(P<0.05);与CQ组比较,CQ+PDTC组裸鼠移植瘤体积和质量明显升高(P<0.05).与对照组比较,CQ组RAW264.7细胞和裸鼠肿瘤组织中M1型巨噬细胞百分率明显升高(P<0.05),M2型巨噬细胞百分率明显降低(P<0.05);PDTC组RAW264.7细胞和裸鼠肿瘤组织中M1型巨噬细胞百分率明显降低(P<0.05),M2型巨噬细胞百分率明显升高(P<0.05).与CQ组比较,CQ+PDTC组RAW264.7细胞和裸鼠肿瘤组织中M1型巨噬细胞百分率明显降低(P<0.05),M2型巨噬细胞百分率明显升高(P<0.05).与对照组比较,CQ组RAW264.7 细胞培养上清和裸鼠血清中IL-6、TNF-α及iNOS水平明显升高(P<0.05),TGF-β、Arg-1和IL-10水平明显降低(P<0.05);PDTC组RAW264.7细胞上清和裸鼠血清中IL-6、TNF-α及iNOS水平明显降低(P<0.05),TGF-β、Arg-1和IL-10水平明显升高(P<0.05).与CQ组比较,CQ+PDTC组RAW264.7 细胞上清和裸鼠血清中IL-6、TNF-α及iNOS水平明显降低(P<0.05),TGF-β、Arg-1和IL-10水平明显升高(P<0.05).与对照组比较,CQ组RAW264.7细胞和裸鼠肿瘤组织中p-IκB-α/IκB-α比值及p-NF-κB p65/NF-κB p65比值明显升高(P<0.05),PDTC组RAW264.7细胞和裸鼠肿瘤组织中p-IκB-α/IκB-α比值及p-NF-κB p65/NF-κB p65比值明显降低(P<0.05).与CQ组比较,CQ+PDTC组RAW264.7细胞和裸鼠肿瘤组织中p-IκB-α/IκB-α比值及p-NF-κB p65/NF-κB p65比值明显降低(P<0.05).结论:CQ可通过激活NF-κB信号通路促进巨噬细胞从M2型向M1型极化,进而抑制肝癌HepG2细胞增殖、迁移、侵袭和裸鼠皮下移植瘤生长.