换一批
换一批四种不同方法提取人粪便细菌基因组脱氧核糖核酸的比较
Comparison of bacterial genomic DNA extraction from human feces in four different methods
摘要目的：比较四种方法提取人粪便细菌基因组DNA 的效果。方法：收集30例健康受试者的粪便，采用改进的氯仿抽提法、改进的十六烷基三甲基溴化铵（cetyl trimethyl ammonium bromide ，CTAB）法、改进的液氮冻融法及粪便基因组脱氧核糖核酸（deoxyri‐bonucleic acid ，DNA）试剂盒法提取 DNA ，通过微量紫外分光光度计对总产量和纯度进行分析。并选择 V3区配对的引物，PCR 扩增细菌16S rDNA基因序列，比较不同方法提取人粪便基因组DNA 效率的差异。结果：采用改进的氯仿抽提法、改进的CTAB 法、改进的液氮冻融法提取和粪便基因组DNA 试剂盒法提取的DNA 浓度分别为（91．05±58．35）ng／μL、（7．06±3．25）ng／μL、（784．00±69．13）ng／μL、（209．98±39．30）ng／μL ，四组两两比较，差异具有统计学意义（ P ＜0．01）。结论：粪便基因组DNA试剂盒法在提取的基因组 DNA纯度、PCR产物扩增电泳，耗时等方面均优于其他三种方法。但改进的氯仿抽提法、改进的 CTAB 法、改进的液氮冻融法的优点是满足后期使用条件的前提下，提取费用相对较低。
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发布时间
2015-08-24
基金项目
内蒙古自治区高等学校科学研究项目(NJZY14264)
内蒙古自治区卫生和计划生育委员会医疗卫生科研计划项目
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