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蒙药额尔敦-乌日勒促进斑马鱼脊髓损伤修复的实验研究

Experimental study on Mongolian medicine Eerdun-Wurile promoting the repair of spinal cord injury in zebrafish

摘要目的:探究蒙药额尔敦-乌日勒对脊髓损伤斑马鱼的促神经再生作用.方法:1 dpf斑马鱼在胚胎培养养殖水中添加乙醇处理48 h,3 dpf洗去乙醇后完成脊髓损伤模型,造模过程中按乙醇毒理学实验探究乙醇添加体积,通过额尔敦-乌日勒的毒理学实验确定额尔敦-乌日勒的给药浓度;75尾1 dpf斑马鱼胚胎完全随机分成3组,分别为对照组(control group,CON)、模型组(model group,MOD)和药物组(Eerdun-Wurile group,EW),CON不做损伤处理,仅在3 dpf加入与药物组给药等量的溶剂处理24 h;MOD加入乙醇制备损伤模型,使用斑马鱼1 dpf胚胎,在培养养殖水中加入2%的乙醇处理48 h,后洗去乙醇,加入培养养殖水处理24 h;EW乙醇损伤处理后,洗去乙醇,加入培养养殖水,加入100 μg/mL额尔敦-乌日勒溶液处理24 h.每组实验均重复3次,使用激光共聚焦显微镜采集图像,共聚焦配套软件分析斑马鱼外周神经元长度,斑马鱼行为轨迹跟踪系统分析各组斑马鱼的运动参数.结果:毒理学实验结果表明,构建损伤模型的最适乙醇体积分数为2%;额尔敦-乌日勒的最大给药浓度为200 μg/mL;给药浓度为100 μg/mL,EW斑马鱼的外周运动神经再生促进率为13.91%(P<0.05),运动能力恢复促进率为32.09%(P<0.05),斑马鱼的外周运动神经元再生长度提高,运动能力改善.结论:蒙药额尔敦-乌日勒对斑马鱼脊髓损伤神经元有修复和促进再生作用,同时能有效改善损伤斑马鱼的运动能力.

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