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细胞爬片式共培养模型的建立和优点

Establishment and advantages of cell crawing sheets co-culture model

摘要目的 探究不同共培养模式下人肺腺癌A549细胞对人脐静脉内皮融合细胞EA.hy.926细胞表型及功能的影响以寻找更适合模拟肿瘤微环境的共培养模型.方法 分别利用细胞爬片和Transwell小室共培养法建立A549细胞与EA.hy.926细胞的共培养模型,通过FITC-葡聚糖细胞渗透实验评估内皮细胞屏障完整性,Western blot检测内皮细胞多糖包被核心蛋白SDC-1、紧密连接蛋白ZO-1、闭合蛋白(Occludin)相关蛋白表达及CCK8实验检测内皮细胞增殖活性,以分析两种共培养模型下EA.hy.926细胞的表型及功能变化.结果 与Transwell小室共培养模型相比:细胞爬片式共培养模型中,EA.hy.926细胞渗透率显著增加(P<0.05),提示内皮细胞完整性破坏,细胞通透性增加;通过Western blot分析,在细胞爬片式共培养模型中EA.hy.926细胞的细胞屏障相关蛋白SDC-1、ZO-1、Occludin蛋白表达下调,破坏明显(P<0.05);细胞爬片式共培养模型中EA.hy.926细胞的增殖活性显著增加(P<0.05).结论 与Transwell小室共培养模型相比,细胞爬片共培养模型能够更真实地模拟肿瘤细胞对内皮细胞的作用,为肺癌转移研究提供了更优的体外研究模型.

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