桑树钙调素蛋白基因MCaM-3的克隆及序列分析与诱导表达
Cloning, Sequence Analysis and Induced Expression of a Calmodulin Gene MCaM-3 From Mulberry
摘要钙调素蛋白(calmodulin CaM )作为真核生物细胞内的多功能Ca~(2+)结合蛋白,在调节植物的生长发育、环境适应性和抗逆性方面具有重要作用.利用桑树表达序列标签(expressed sequence tags,ESTs)克隆了一个编码桑树CaM基因的全长cDNA序列,命名为MCaM-3(GenBank登录号:GQ303247).序列分析表明,MCaM-3全长951 bp,存在143 bp的5′端非翻译序列(5′-UTR)和358 bp的3′端非翻译序列(3′-UTR),其开放读码框(ORF)长450 bp,编码149个氨基酸,预测蛋白质分子质量为16.85 kD,等电点为3.95.用在线软件SMART分析显示,MCaM-3蛋白含有4个Ca~(2+)结合基序(EFh)结构域,可以结合Ca~(2+).同源分析表明,CaM基因在桑树与拟南芥、杨树、大豆、小麦、水稻、玉米各物种间具有很高的保守性.基于桑树和其它19个物种CaM基因的系统进化分析表明,桑树与蓖麻、烟草、大黄、樱桃的亲缘关系较近.半定量RT-PCR检测表明,与正常生长环境相比,MCaM-3基因mRNA的转录水平在低温、干旱、盐胁迫条件下均显著提高,初步推测MCaM-3基因与桑树的抗逆性有一定关联.
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