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家蚕Mod基因的序列分析及表达与亚细胞定位研究

Sequence Analysis, Expression Profile and Subcellular Localization of Mod Gene in the Silkworm, Bombyx mori

摘要已知多数含BTB/POZ结构域的锌指蛋白对生物体的发育、分化及染色体重组等具有重要的调节作用.从已构建的家蚕蛹cDNA文库中筛选到一条编码MOD(mdg4)蛋白的基因序列(GenBank登录号:DN237077).该基因序列的ORF长1 080 bp,编码359个氨基酸残基,蛋白含有BTB保守结构域和FLYWCH保守结构域,与黑腹果蝇、冈比亚按蚊、赤拟谷盗和埃及伊蚊的MOD多序列比对,其同源性不超过40%.表达、纯化带有His标签的家蚕MOD蛋白(BmMOD),并用纯化的融合蛋白免疫新西兰兔获得多克隆抗体.实时荧光定量PCR显示BmMod基因mRNA转录水平在家蚕蛾期及5龄幼虫的卵巢最高,推测BmMod基因在家蚕生殖腺发育过程中产生一定作用.利用纯化的BmMOD蛋白多克隆抗体进行Western blotting分析也表明该蛋白在家蚕蛾期及5龄幼虫卵巢中的表达量最高,验证了BmMod在家蚕生殖腺发育中的功能.亚细胞定位结果显示BmMOD蛋白几乎完全定位于家蚕卵巢上皮细胞(BmN)的细胞核中.

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作者 周秋梅 [1] 金勇丰 [2] 张耀洲 [1] 学术成果认领
作者单位 浙江理工大学生物化学研究所,浙江省家蚕生物反应器和生物医药重点实验室,杭州,310018 [1] 浙江大学生命科学学院生物化学研究所,杭州,310058 [2]
分类号 S881.2Q78
栏目名称 研究报告
DOI 10.3969/j.issn.0257-4799.2009.04.007
发布时间 2010-03-02
基金项目
国家重点基础研究发展规划(973计划) 国家高技术研究发展计划(863计划)
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