ADCY6通过上皮-间质转化抑制结直肠癌细胞增殖、迁移和侵袭
ADCY6 suppresses cell proliferation,migration and invasion via epithelial-mesenchymal transition in colorectal cancer
摘要目的:探究腺苷酸环化酶亚型6(ADCY6)表达量在结直肠癌(CRC)细胞增殖、迁移和侵袭中的作用机制.方法:通过生物信息学数据库分析ADCY6 在各种肿瘤中的表达情况,并分析ADCY6 表达水平与结直肠癌患者不良预后及临床病理特征的关系.使用定量实时逆转录(RT-qPCR)和蛋白质免疫印迹(Western blot)法检测结直肠癌细胞中ADCY6 mRNA和蛋白表达.CCK-8 法检测ADCY6 对结直肠癌细胞增殖的影响,Transwell实验用于检测ADCY6 对细胞迁移和侵袭的影响.将转染ADCY6 过表达载体的结直肠癌细胞皮下注射到BALB/c小鼠中,构建裸鼠移植肿瘤动物模型,计算肿瘤体积和质量,绘制生长曲线.然后在结直肠癌细胞中过表达ADCY6 检测上皮-间充质转化(EMT)关键蛋白的表达以证实ADCY6 通过抑制EMT发挥作用.结果:ADCY6 在多种恶性肿瘤中低表达,ADCY6 mRNA在CRC组织中的表达水平降低,且ADCY6 蛋白在结肠癌中也低表达.ADCY6 的表达与年龄、肿瘤分期和淋巴结转移相关.ADCY6 在FHC细胞中的表达水平高于CRC细胞.过表达ADCY6 可抑制CRC细胞的增殖、迁移和侵袭,且ADCY6 过表达可抑制肿瘤体积和重量.ADCY6 的上调可导致EMT相关的N-钙粘蛋白、波形蛋白和Ki-67 的表达水平降低,同时导致细胞黏附分子的表达水平增升高.结论:ADCY6 的低表达与CRC患者的不良预后有关,且ADCY6 可能通过介导EMT抑制CRC细胞的恶性生物学行为.
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