iNKT细胞过继转移对哮喘小鼠肺部免疫细胞-神经元相互作用的研究
Study of immune cell-neuron interactions in the lungs of asthma mice by adoptive transfer of iNKT cells
摘要目的:观察iNKT细胞过继转移对哮喘小鼠肺部免疫细胞与神经元相互作用的影响,探讨其在哮喘免疫调节中的潜在机制.方法:选取30只雌性BALB/c小鼠作为研究对象,随机分为对照组、哮喘组和iNKT细胞转移组.对照组接受等量的生理盐水注射,不进行OVA致敏和激发,也不进行iNKT细胞转移;哮喘组按照标准的OVA致敏和激发方案建立哮喘模型,不进行iNKT细胞转移;iNKT细胞转移组在建立哮喘模型后通过尾静脉注射iNKT细胞.模型建立通过HE染色和显微镜观察肺组织的炎症细胞浸润程度进行验证.通过流式细胞术分析T细胞、B细胞和巨噬细胞等肺部免疫细胞群体水平的变化.免疫荧光染色用于检测肺组织神经元标志物(NeuN、ChAT)的表达.ELISA用于检测肺部组织中炎症因子(TNF-α、IL-6、IL-13)和神经递质(乙酰胆碱、去甲肾上腺素)水平.结果:MTT结果显示,与对照组相比,哮喘组的细胞存活率明显更低(P<0.05),iNKT过继转移后,细胞存活率较哮喘组升高(P<0.05);流式细胞术分析显示,与哮喘组相比,iNKT细胞转移组小鼠肺部T细胞和巨噬细胞的比例增加(P<0.05),B细胞比例降低(P<0.05).免疫荧光染色结果显示,iNKT细胞转移组小鼠肺组织中神经元标志物NeuN和ChAT的表达水平高于哮喘组(P<0.05).ELISA结果显示,iNKT细胞转移组小鼠的炎症因子TNF-α、IL-6和IL-13的水平显著低于哮喘组(P<0.05),iNKT细胞过继转移组小鼠肺组织中的乙酰胆碱和去甲肾上腺素水平显著高于哮喘组(P<0.05).结论:过继转移iNKT细胞能够调节哮喘小鼠肺部免疫细胞的组成,降低炎症因子水平,显示出潜在的治疗哮喘的作用.
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