一种快速高效的中药材DNA提取方法的建立和优化
Establishment and Optimization of a Rapid and Efficient DNA Extraction Method for Traditional Chinese Medicinal Materials
摘要目的:建立一种快速、高效的DNA提取方法,解决中药材成分复杂,DNA提取困难的问题,以便于利用DNA分子鉴定技术实现中药材及其成药当中原料药的真伪鉴定.方法:针对中药材来源多样,成分复杂的特点,对传统CTAB法和试剂盒法进行改进和优化,考察药材粉末的CTAB加入比例、蛋白酶K和α-高聚淀粉酶的加入量以及水浴温度和水浴时间.结果:当加入药材粉末15 mg,CTAB 300 mL,蛋白酶K(20 mg/mL)20 μL、α-高聚淀粉酶(75 mg/mL)20 μL,95℃水浴1-5 min,DNA提取效率最高.结论:本文创新性采用复合酶解体系DNA提取法,相比于传统CTAB法和试剂盒法,大大减少了提取时间,提高了提取效率,适用于根茎类、花叶类等各类中药材,并且在富含淀粉的中药材的DNA提取方法中优势显著,为中药材的分子鉴定奠定了基础.
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