换一批摘要目的 体外分离培养原代星形胶质细胞,在星形胶质细胞中克隆Foxp1基因编码区序列(CDS)区并过表达.方法 利用机械分离法获取小鼠原代星形胶质细胞;异硫氰酸胍法(TRIzol法)提取原代星形胶质细胞内总RNA并逆转录为cDNA,克隆CDS区、测序;利用美国国家生物技术信息中心(NCBI)和SnapGene软件对测序结果与NCBI库内小鼠中4个Foxp1转录本的CDS区进行对比;将星形胶质细胞中Foxp1基因的CDS克隆到表达载体上,并转染到HEK293T细胞内验证其表达.结果 体外成功分离培养原代星形胶质细胞,且纯度达95％及以上;克隆出星形胶质细胞内Foxp1的CDS,相较参考序列Foxp1转录本4的CDS,其在514/515处插入3个连续碱基AGC;将克隆有Foxp1基因CDS区的表达载体转入HEK293T细胞内后可见在约106 kD处有Foxp1蛋白表达.结论 成功分离培养原代星形胶质细胞并获取Foxp1新的CDS.
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分类号
R741.02（神经病学）
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1674-2257.2022.03.001
发布时间
2022-06-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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