色谱串联质谱检测血清腺苷及肌苷浓度的方法学建立

Establishment of a Method for Determination of Serum Adenosine and Inosine by Chromatography Tandem Mass Spectrometry

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摘要目的建立一种基于高效液相色谱串联质谱(LC-MS)测定血清腺苷及肌苷浓度的方法,并检测血清样本中腺苷及肌苷的稳定性.方法采用正离子模式及多反应监测(MRM)扫描模式定量分析血清肌苷和腺苷浓度,内标物采用拉米夫定.腺苷、肌苷及内标物的定量分析离子对分别为:质荷比(m/z):268.1/136.1、268.9/137.1、230.0/112.0.检测血清样本在4 ℃及-80 ℃保存条件下腺苷及肌苷的稳定性.结果本实验建立的检测方法可同时检测血清腺苷和肌苷浓度,血清腺苷的检测限为:2.5～1 000 pg/L(R2＞0.99),血清肌苷的检测限为:2.5～1 000 μg/L(R2＞0.99).腺苷和肌苷检测的准确度为:85.77％～97.57％;精密度相对偏差＜8％.在4 ℃保存4 h后,腺苷和肌苷分别降解至1 h检测浓度的3.33％和88.30％;在-80 ℃保存24 h后,腺苷和肌苷分别降解至1 h检测浓度的71.70％和84.00％.进一步利用构建的方法检测29例健康人血清腺苷及肌苷水平,结果显示:健康人血清腺苷浓度为(452.471±293.793)μg/L,血清肌苷浓度为(30.547±14.160)μg/L,性别差异无统计学意义(P＞0.050).结论本实验构建的方法可用于同时检测血清中腺苷及肌苷浓度,准确度和精密度较高.血清中腺苷易降解,而肌苷相对稳定,肌苷更适合作为检验指标.