换一批DJ-1蛋白在有丝分裂期的表达、分布及其对细胞有丝分裂启动的影响
Expression and Distribution of DJ-1 Protein During Mitosis and Its Impact on Mitotic Entry
摘要目的 探讨帕金森病相关去糖化酶(DJ-1)蛋白在有丝分裂期的表达和分布情况,及其对细胞有丝分裂启动的影响.方法 利用诺考达唑将肿瘤细胞HeLa和非肿瘤细胞HEK293T阻断在有丝分裂期,通过蛋白质印迹法比较DJ-1蛋白在细胞有丝分裂期和分裂间期的表达差异;利用免疫荧光法检测DJ-1蛋白在细胞有丝分裂各时期的分布情况;利用siRNA敲低HeLa细胞中的DJ-1基因,通过双胸苷阻断释放法同步化细胞,观察DJ-1敲低对细胞有丝分裂启动的影响.结果 DJ-1蛋白在细胞有丝分裂期的表达量比分裂间期高,差异有统计学意义(P<0.05);DJ-1蛋白在有丝分裂期未分布于中心体、着丝粒、微管及染色体上,其弥散分布于细胞质中;与对照组相比,在双胸苷阻断释放10、11、12、13 h时,DJ-1敲低组有丝分裂细胞比例降低,差异有统计学意义(P<0.05).结论 DJ-1蛋白在细胞有丝分裂期的表达量高于分裂间期,其在有丝分裂期弥散分布于细胞质中,DJ-1蛋白表达下调导致细胞有丝分裂启动延迟.
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