换一批LncRNA KCNQ1OT1调节miR-183-5p/ATG5轴对OGD/R诱导的小胶质细胞损伤的影响
Effect of LncRNA KCNQ1OT1 on Oxygen-Glucose Deprivation/Reoxygenation-Induced Microglial Injury by Regulating miR-183-5p/ATG5 Axis
摘要目的 研究长链非编码RNA钾电压门控通道亚家族 Q1重叠转录物1(LncRNA KCNQ1OT1)调节微小RNA(miR)-183-5p/自噬相关蛋白5(ATG5)轴对氧糖剥夺/复氧(OGD/R)诱导的小胶质细胞损伤的影响.方法 将体外培养的人HMC3小胶质细胞随机分为 Con组、OGD/R组、sh-NC组、sh-LncRNA KCNQ1OT1组、sh-LncRNA KCNQ1OT1+anti-NC组、sh-LncRNA KCNQ1OT1+anti-miR-183-5p组.qRT-PCR 实验测定各组细胞中 LncRNA KCNQ1OT1、miR-183-5p、ATG5 mRNA表达,双荧光素酶实验验证LncRNA KCNQ1OT1与 miR-183-5p、miR-183-5p与 ATG5调控的关系,CCK8、流式细胞术、蛋白质印迹技术测定各组细胞的增殖、凋亡及相关蛋白表达,蛋白质印迹技术检测 ATG5与自噬相关蛋白的表达.结果 与 OGD/R或sh-NC组相比,sh-LncRNA KCNQ1OT1组细胞中LncRNA KCNQ1OT1、ATG5 mRNA和蛋白质、凋亡率、cleaved caspase-3、Bax、LC3Ⅱ/Ⅰ蛋 白 表 达 降 低,miR-183-5p、存活率、PCNA、Bcl-2、P62蛋白表达增多(P<0.05);与sh-LncRNA KCNQ1OT1或sh-LncRNA KCNQ1OT1+anti-NC组相比,sh-LncRNA KCNQ1OT1+anti-miR-183-5p组细胞中LncRNA KCNQ1OT1无显著变化(P>0.05),ATG5 mRNA和蛋白质、凋亡率、cleaved caspase-3、Bax、LC3Ⅱ/Ⅰ蛋白表达增 多,miR-183-5p、存活率、PCNA、Bcl-2、P62蛋白表达减少(P<0.05).LncRNA KCNQ1OT1靶向负调控 miR-183-5p,miR-183-5p靶向负调控ATG5(P<0.05).结论 下调LncRNA KCNQ1OT1的表达可通过调节 miR-183-5p/ATG5轴,抑制 OGD/R诱导 HMC3小胶质细胞的自噬和凋亡,进而抑制细胞损伤.
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