换一批用聚合酶链反应制备抗端粒酶蛋白重链和轻链可变区基因
Preparing heavy and light chain variable region genes for antitelomerase protein hTERT by the polymerase chain reaction
摘要目的:为了制备抗端粒酶蛋白hTERT可变区基因.方法:采用Ni-NTA树脂层析法从PBKTRT转染的E.coliJM109阳性菌中分离纯化端粒酶蛋白hTERT,并免疫小鼠.从免疫的小鼠脾脏中提取淋巴细胞中总RNA,逆转录成cDNA,以逆转录合成的cDNA第一条链为模板,分别用VH和VL引物,通过PCR进行扩增.结果:PCR扩增反应产生350bo大小的抗hTERT重链和轻链可变区基因.VH和VL基因片段的获得为进一步制备抗hTERT单功能区抗体(dABs)和单链抗体ScFv奠定了实验基础.结论:提示该方法具有稳定性好,易于重复,扩增后VH和VL量较高的优点.
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分类号
R392.11（医学免疫学）
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.0253-3626.2001.02.007
发布时间
2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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