RNAi沉默clusterin基因对卵巢癌SKOV3细胞放射敏感性的影响
Influence of silencing clusterin by RNAi on radiosensitivity of human ovarian carcinoma SKOV3 cell-line
摘要目的:研究clusterin(CLU)基因沉默对卵巢癌SKOV3细胞放射敏感性的影响.方法:靶向CLU基因的siRNA转染卵巢癌SKOV3细胞,Western blot法测定CLU基因蛋白表达水平.给予不同放射剂量(2、4、6Gy)处理后,通过MTT法及克隆形成实验检测卵巢癌SKOV3细胞的存活率及克隆形成率,流式细胞仪Annexin V/PI法检测凋亡率.结果:靶向CLU基因的siRNA特异性地从蛋白水平抑制了CLU基因表达.MTT及克隆形成实验结果显示卵巢癌SKOV3细胞的存活率及克隆形成率与放射剂量呈反比,剂量越大,存活率及克隆形成率越低,差异均具有统计学意义(P<0.05).流式细胞仪Annexin V/PI法检测结果表明:2Gy放疗后实验组细胞凋亡率明显增加,达(24.32±1.75)%,较单纯放射组升高约12%,差异具有明显统计学意义(P<0.05).结论:CLU基因沉默可以明显增强卵巢癌SKOV3细胞对放射的敏感性,为卵巢癌放疗增敏基础研究提供了新的靶点.
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