换一批
换一批摘要目的:考察重组苛求芽孢杆菌尿酸酶作为诊断试剂的剂型和储存方法.方法:将此重组尿酸酶制成干粉和液体剂型于-18℃和4℃储存,定期测定酶活性；在干粉制剂时加入保护剂于-18℃储存,在液体制剂时加人防腐剂于4℃储存,间隔适当时间监测酶活性.聚丙烯酰胺凝胶电泳分离此尿酸酶四聚体和二聚体,染色检测蛋白和酶活性.结果:此尿酸酶干粉和液体制剂在4℃储存28 d后对应的剩余酶活性分别为12％和100％,在-18℃冻存28 d后对应的剩余酶活性分别为24％和92％.在干粉制剂时加海藻糖、蔗糖或甘露醇作为保护剂于-18℃储存56 d后,剩余酶活性对应分别为100％、76％和43％.加叠氮钠或苯甲酸的液体制剂,在4℃储存56 d后对应的剩余酶活性分别为99％和82％.在-18℃储存至无活性的冻干粉制剂经非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分析,发现此尿酸酶主要以无活性二聚体存在而活性四聚体很少.结论:此尿酸酶作为诊断试剂,可加入叠氮钠制成液体剂型在4℃储存.
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分类号
Q55
栏目名称
技术与方法
DOI
10.3969/j.issn.0253-3626.2012.03.011
发布时间
2012-08-31
基金项目
国家自然科学基金资助项目
重庆市科委重点资助项目
教育部科学技术研究重点资助项目
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