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ERK5信号通路参与BMP9诱导C3H10T1/2细胞向心肌样细胞的分化

Involvement of ERK5 signaling pathway in the cardiomyocyte-like differentiation of C3H10T1/2 cells induced by bone morphogenetic protein 9

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摘要目的:研究细胞外信号调节激酶5(extracellular signal-regulated kinase 5,ERK5)信号通路在骨形态发生蛋白9(bone morphogenetic protein 9,BMP9)诱导C3H10T1/2细胞向心肌样细胞分化中的作用.方法:用AdBMP9和AdGFP转染C3H10T1/2细胞,流式细胞术检测转染效率,Westem blot检测磷酸化ERK5 (phosphorylation ERK5,p-ERK5)和ERK5的表达水平,免疫荧光检测p-ERK5在细胞内的表达位置;ERK5特异性抑制剂BIX02189预处理细胞再经AdBMP9诱导,Western blot检测p-ERK5和ERK5表达水平,RT-qPCR检测心肌特异性基因肌细胞增强因子(myocyte enhancer factor,MEF)2C、GATA结合蛋白4(GATA binding protein 4,GATA4)表达,Western blot检测心肌特异性蛋白缝隙连接蛋白43 (connexin 43,CX43)、心肌肌钙蛋白T(cardiac troponin T,cTnT)表达.结果:AdGFP与AdBMP9的转染效率达50％左右,经AdBMP9诱导后的细胞p-ERK5表达明显增高(P＜0.01),免疫荧光结果显示BMP9组p-ERK5表达明显增强且主要集中于胞核;15 μmol/L BIX02189可完全抑制p-ERK5的表达(P＜0.01),且明显降低了由AdBMP9诱导的C3H10T1/2细胞GATA4、MEF2C基因与CX43、cTnT蛋白表达(P=0.000).结论:BMP9可以通过激活ERK5信号通路调控C3H10T1/2细胞向心肌样细胞分化.