换一批基质金属蛋白酶抑制剂1和2 siRNA对CCl4诱导的肝纤维化大鼠Smad7蛋白表达的影响
Effect of tissue inhibitor of metalloproteinases 1 and 2 siRNA on the expression of Smad7 protein in hepatic fibrosis rats
摘要目的:研究基质金属蛋白酶抑制剂(tissue inhibitor of metalloproteinases,TIMP)1和2的siRNA对CCl4诱导的肝纤维化大鼠Smad7蛋白表达的影响.方法:采用前期构建的TIMP-1 siRNA、TIMP-2 siRNA治疗肝纤维化大鼠的肝脏组织作为研究对象,分为正常组、模型组、阴性对照组(0.25 mg/kg非特异性靶序列)、TIMP-1 siRNA 0.25 mg/kg组和TIMP-2 siRNA 0.25 mg/kg组.Real-time PCR法检测Smad7的mRNA表达;免疫组织化学、Western blot检测Smad7的蛋白表达.结果:Real-time PCR结果显示TIMP-1 siRNA 0.25 mg/kg组(59.7±3.3)％、TIMP-2 siRNA 0.25 mg/kg组(60.2±3.4)％ Smad7的mRNA表达量均较模型组(28.0±1.6)％、阴性对照组(28.6±1.7)％明显增加(P=0.000);免疫组织化学结果显示TIMP-1 siRNA 0.25mg/kg组(8.55±0.67)、TIMP-2 siRNA 0.25 mg/kg组(8.23±0.85)Smad7的蛋白表达量均较模型组(4.25±0.53)、阴性对照组(4.19±0.55)明显增加(P=0.000).Western blot结果显示TIMP-1 siRNA 0.25 mg/kg组(0.706±0.039)、TIMP-2 siRNA 0.25 mg/kg组(0.698±0.038)Smad7的蛋白表达量均较模型组(0.278±0.013)、阴性对照组(0.285±0.014)明显增加(P=0.000).结论:TIMP-1 siRNA、TIMP-2siRNA对于肝纤维化Smad7的表达有促进作用.
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