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乙肝病毒X蛋白通过Wnt/β-catenin信号通路调控Gankyrin表达

Regulation on expression of Gankyrin by hepatitis B virus X protein through Wnt/β-catenin signaling

摘要目的:研究乙肝病毒X蛋白(hepatitis B virus X protein,HBX)对Gankyrin表达水平的影响以及Wnt/β-catenin信号通路在HBX基因调控Gankyrin表达中的作用.方法:HBX腺病毒表达载体(Ad-HBX-GFP)感染转染2种人肝癌细胞系HepG2、SMMC-7721细胞,Si-HBX分子(Si-HBX oligo)用LipofectamineTM 2000转染入HepG2.2.15细胞,用RT-PCR和Western blot法检测HBX与Gankyrin的表达情况;β-catenin腺病毒载体转染HepG2、SMMC-7721细胞,用Western blot法检测β-catenin与Gankyrin的表达情况;在沉默β-catenin表达的HepG2、SMMC-7721细胞中过表达HBX基因,Western blot法检测β-catenin与Gankyrin的表达情况.结果:①HepG2.2.15细胞中Gankyrin mRNA与蛋白表达水平均高于HepG2细胞(P<0.05).②HepG2与SMMC-7721细胞系中Ad-HBX-GFP组Gankyrin mRNA与蛋白表达水平均高于绿色荧光蛋白腺病毒表达载体(Ad-GFP)组(P<0.01).③HepG2.2.15细胞中Si-HBX组Gankyrin mRNA与蛋白表达水平均低于Si-阴性对照(Si-NC)组(P<0.01).④在HepG2与SMMC-7721细胞系中过表达HBX后,Ad-HBX-GFP组β-catenin的蛋白表达水平均高于Ad-GFP组(P<0.01).⑤在HepG2与SMMC-7721细胞系中过表达β-catenin后,β-catenin腺病毒表达载体(Ad-β-catenin-GFP)组Gankyrin的蛋白表达水平均高于Ad-GFP组(P<0.01).⑥在HepG2与SMMC-7721细胞系中沉默β-catenin后,过表达HBX基因,Si-β-catenin腺病毒表达载体(Ad-si-β-catenin-RFP)组与红色荧光蛋白腺病毒表达载体(Ad-RFP)组相比,Gankyrin的蛋白表达水平未见升高(P<0.01).结论:HBX-Wnt/β-catenin-Gankyrin信号转导通路存在与肝癌细胞中,抑制β-catenin的功能可阻遏HBX对Gankyrin的上调作用,本结果将可能为肝癌的治疗提供新的思路.

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重庆医科大学学报

重庆医科大学学报

2014年39卷7期

923-928页

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