摘要目的:从大容量甲状腺髓样癌(medullary thyroid carcinoma,MTC)人源噬菌体单链抗体(single chain variable fragments,scFv)库中筛选出特异的抗MTC单链抗体,并对其生物学特性进行鉴定.方法:分别以甲状腺上皮细胞TEC细胞株和MTC细胞TT细胞株为抗原进行5轮"吸附-洗脱-扩增"的富集循环,筛选出抗MTC抗体,将筛选出的阳性克隆感染E.coli HB2151;异丙基-β-9-硫代吡喃半乳糖苷(isopropylβ-D-1-thiogalactopyranoside,IPTG)诱导抗体可溶性表达,HiTrapTM Anti E-tag柱纯化表达抗体;SDS-PAGE和Western blot检测抗体表达和相对分子质量;ELISA检测可溶性scFv的特异性和免疫活性,分为TT细胞组、SW480细胞组、TEC细胞组和PBS空白对照组,分别检测各组在酶标仪A450nm处的吸光度;四甲基偶氮唑盐比色分析法(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)分别检测TT细胞组、SW 480细胞组与不同浓度svFv反应并读取A490nm处的吸光度,设置空白对照PBS组,分别计算细胞抑制率.结果:5轮筛选后,抗体得到了明显富集.随机挑取单个细菌克隆,phage ELISA和scFvELISA阳性率分别为65％和50％.SDS-PAGE、Western blot结果显示MTC特异性抗体分子量为28 kD左右.ELISA结果显示,TT细胞组的吸光度(0.41±0.12)较SW 480细胞组(0.20±0.03)、TEC细胞组(0.13±0.01)、PBS空白对照组(0.07±0.01)明显增加(P=-0.000).MTT法结果显示,TT细胞组和SW 480细胞组在scFv浓度为0.1、1、10 mol/L时,2细胞株间抑制率有统计学意义,统计量分别是t=2.881,P=0.02;t=5.073,P=-0.006;t=7.324,P=0.000,且在scFv浓度为10 μmol/L时,对TT细胞的抑制率最高(0.59±0.15)％.结论:利用噬菌体抗体库技术成功获得了特异性的抗MTC人源单链抗体.