摘要目的:建立一种基于多重实时荧光定量聚合酶链反应(multiple real-time fluorescence quantitative polymerase chain re-action,多重PCR)技术的检测体系,快速、特异检测脓毒症患者血液中的病原菌.方法:分析血液标本分离菌主要菌种分布,绘制脓毒症特异性病原微生物谱.同时根据保守区序列设计特异性引物,构建多重PCR检测反应体系.收集脓毒症患者静脉全血样本79例,健康体检者样本(阴性样本)40例,用所建立的检测体系进行鉴定,并与血培养方法比较.结果:多重PCR法缩短检出时间至3 h,是血培养法的1/16.多重PCR法对目标病原菌样本符合率为88%(22/25),阴性样本符合率为100%(20/20),总符合率为94%,2种方法对目标病原菌的检出差异无统计学意义(P=0.250),且一致性良好(Kappa=0.867,P<0.05).多重PCR法与血培养法对临床诊断脓毒症样本的检出率分别为23.0%(17/74)及14.9%(11/74),2种方法间检出率差异有统计学意义(P=0.031).结论:与经典的"金标准"血培养法相比,本项目构建的多重PCR法检测时间短、符合率好、检出率更高,可为脓毒症患者更早诊断和治疗提供可靠依据.
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