基于miRNA-mRNA表达谱分析增液汤对功能性便秘大鼠结肠组织功能的调节作用
Regulatory effect of Zengye Decoction on colonic tissue function in rats with functional constipation:a study based on microRNA-messenger ribonucleic acid expression profile
摘要目的:探讨增液汤对功能性便秘大鼠结肠组织微小核糖核酸MicroRNA(miRNA)-信使核糖核酸(messenger ribo-nucleic acid,mRNA)表达的影响.方法:将18只SPF级SD大鼠随机分为对照组、模型组和治疗组.模型组和治疗组均给予复方地芬诺酸混悬液治疗便秘.治疗组造模后给予增液汤治疗7 d,记录大鼠粪便情况和收集大鼠结肠组织.苏木素-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色观察大鼠结肠病变,结肠组织进行转录组测序,实时荧光定量逆转录聚合酶链反(real time quanti-tative reverse transcription PCR,RT-qPCR)验证测序结果.结果:与对照组比较,模型组大鼠首粒黑便排出时长明显延长(F=341.909,P<0.001),粪便颗粒数明显减少(F=116.800、86.502,P<0.001),粪便含水量明显降低(F=234.897、388.500,P<0.001);小肠推进率明显降低(F=5 249.009,P<0.001);大鼠结肠组织病变明显.与模型组比较,治疗组大鼠首粒黑便排出时长明显缩短(F=341.909,P<0.001),14 d粪便颗粒数明显增加(F=116.800、86.502,P<0.01),粪便含水量明显增加(F=234.897、388.500,P<0.001);小肠推进率明显上升(F=5 249.009,P<0.001),结肠组织未见明显病变.增液汤导致结肠miRNA-mRNA网络表达谱的改变.转录组测序共筛选出541个差异表达的mRNA(241个下调和300个上调),17个差异表达的miRNA(12个下调和5个上调)(P<0.05).基因本体(gene ontology,GO)功能分析发现差异表达的mRNA-miRNA主要富集在细胞内.京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)富集通路分析发现差异表达的mRNA主要富集于cGMP-PKG信号通路和cAMP信号通路.结论:增液汤治疗减少了大鼠排便时间,增加了大鼠排便颗粒数,增加了大鼠粪便含水量,增加了大鼠肠道蠕动,改变了大鼠结肠miRNA-mRNA表达谱,改善大鼠便秘症状.
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