换一批DNMT3B mRNA 3′非编码区报告基因载体的构建与功能验证
DNMT3B mRNA 3′untranslation region report vector construction and the relationship to atherosclerosis
摘要目的：构建用于鉴定microRNA（miRNA）靶基因的报告基因系统并进行功能验证，为研究动脉粥样硬化的发生发展机制奠定良好基础。方法在pGL3-control载体的荧光素酶基因下游克隆位点插入DNA甲基转移酶3B（DNMT3B）3′非编码区序列，经酶切、测序验证是否插入及正确性。生物信息学分析 DNMT3B与 miRNA-125b的靶向关系，并用 miRNA-125b过表达载体与所构建载体共转染人血管平滑肌细胞，双荧光素酶报告基因系统检测荧光素酶活性。结果成功构建了DNMT3 B 3′非编码区报告基因载体，经酶切和测序鉴定正确；共转染细胞24 h后，双荧光素酶报告基因系统检测荧光素酶活性，结果显示与空载体对照组相比，构建载体组荧光素酶活性下降了54．8％（P＜0．01）。结论成功构建了DNMT3B mRNA 3′非编码区报告基因载体，且提示miRNA-125b靶向调控了DNMT3B。
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关键词
DNA甲基转移酶3B微 RNAs动脉粥样硬化表遗传学双荧光素酶报告基因系统DNA methyltransferase 3BmicroRNAsarthrosclerosisepigeneticsdual luciferase reporter gene system
医学主题词
基因, 报告(Genes, Reporter)荧光素(Fluorescein)动脉粥样硬化(Atherosclerosis)肿瘤转移(Neoplasm Metastasis)遗传学(Genetics)
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1671-8348.2014.13.020
发布时间
2014-06-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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