选择适宜的灌注去细胞方法应用于全肝脏去细胞支架的制备
Determining the ideal decellularization protocol applied for preparing for liver biological scaffold
摘要目的:对比低浓度十二烷基硫酸钠(SDS)和1% Triton X-100对制备大鼠肝脏去细胞支架(DLBS)的影响,建立一种简单且适宜的DLBS的制备方法。方法将低浓度SDS(0.25%、0.50%)和1% Triton X-100分别加入大鼠肝脏去细胞流程,通过免疫荧光及扫描电子显微镜观察支架结构,并对支架内成分进行定量分析,再通过四氮唑盐比色法(MTT ,Assay)观察支架对C3A的细胞毒性。结果 0.25% SDS和0.50% SDS处理组的DNA定量均小于50 ng/mg干质量,并且糖胺聚糖在0.25%SDS和1% T riton X-100处理组的定量要高于0.50% SDS处理组。同时,M T T 实验表明3种方法处理后的去细胞支架对于C3A细胞的生长无毒性作用。结论应用0.25% SDS在5 mL/min灌注流速下去细胞能够制备更为理想且有效的DLBS ,从而为器官再生打下基础。
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