shRNA抑制survivin基因表达对脐静脉血管内皮细胞增殖与凋亡的影响

Effects of shRNA-mediated survivin silencing on proliferation and apoptosis of human umbilical vein endothelial cells

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摘要目的：研究靶向存活素（survivin）的短发夹 RNA真核表达质粒（shRNA）对脐静脉血管内皮细胞增殖与凋亡的影响。方法合成靶向survivin的shRNA真核表达质粒及阴性对照质粒，用脂质体法将质粒转染至经 VEGF（50 ng／mL）处理的HUVEC细胞；转染48 h后，采用实时定量聚合酶链反应（PCR）和蛋白印迹法检测 HUVEC中survivin的mRNA表达及蛋白水平。四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测细胞增殖；TUNEL 法检测细胞凋亡。结果（1）survivin‐shRNA 质粒试验组与阴性对照shRNA质粒组及空白对照组比较，转染48 h后人脐静脉血管内皮细胞survivin的mRNA及蛋白表达水平明显下降（P＜0．05）。（2）与阴性对照shRNA组及空白对照组比较，转染后的人脐静脉血管内皮细胞增殖能力明显下降。转染后24、48、72 h生长抑制率分别为（13．53±3．91）％、（38．97±1．82）％、（65．75±1．83）％，于转染后72 h最为显著。（3）试验组凋亡率为（28．07±1．71）％，较阴性对照组（11．45±1．52）％和空白对照组（10．04±1．46）％显著增高（P＜0．05）。结论靶向survivin的shRNA质粒能通过下调survivin表达，进而抑制人脐静脉血管内皮细胞增殖并促进其凋亡。