脂肪组织保存条件对体外分离培养人脂肪间充质干细胞的影响

Effect of adipose tissue storage conditions on in vitro isolation and culture of human adipose mesenchymal stem cells

二维码有效期 120s

摘要目的探讨抗生素、脂肪组织保存时间及温度和培养基对体外分离培养人脂肪间充质干细胞(ADMSC)的影响.方法将吸脂术采集的腹部浅层皮下脂肪组织于2～8 ℃、室温(22 ℃)、37 ℃保存0、1、2、3、5、7 d后,采用酶消化法分离提取细胞进行原代培养,用细胞贴壁法纯化,胰酶消化传代;传至第5代ADMSC时用流式细胞术检测表型,并分别在成脂、成骨诱导液中诱导分化,并采用油红O染色、茜素红染色进行鉴定.结果不加庆大霉素比加庆大霉素的脂肪组织分离的原代ADMSC早3d传代.保存0、1、2、3、5d的脂肪组织分离的原代ADMSC初次传代时间分别为接种后5、6、6、7、9 d,而保存7 d的脂肪组织分离的原代ADMSC无法正常扩增.2～8 ℃、室温、37 ℃保存的脂肪组织分离的原代ADMSC 6 d传代时细胞收获量分别为(7.7～8.4)×104、(6.9～7.4)×104、(4.8～5.2)×104/cm2.含核苷比不含核苷培养基早2 d传代.成脂诱导后,诱导细胞分别表现出脂肪细胞和成骨细胞特性,对照细胞均为阴性.结论抗生素、长时间、高温度保存抑制ADMSC增殖,而核苷可促进其增殖.