摘要目的 研究环状RNA(circRNA)hsa_circ_0003304(circAZIN1)在骨关节炎(OA)中调控软骨细胞退变的作用及机制.方法 基因芯片检测人脂肪源性干细胞(hADSC)成软骨分化过程中circRNA的表达水平变化.从基因芯片检测差异化表达最明显的前10位circRNA中,用IL-β及TNF-α构建的软骨细胞炎症模型进一步筛选出circAZIN1,过表达circAZIN1(转染pcDNA3.1-circAZIN1-EF1-ZsGreen质粒)后实时荧光定量PCR(qPCR)检测其对软骨细胞外基质(ECM)代谢的影响.RNA-蛋白体外结合(RNA pull down)试验检测 circAZIN1 结合的蛋白,miRNA-circRNA Interactions 预测 circAZIN1 可能海绵吸附的微 RNA(miRNA)及其位点,进一步利用TargetMiner、miRDB及TargetScan数据库预测circAZIN1可能海绵吸附的miRNA及下游mRNA,过表达 miRNA 后检测circAZIN1、miRNA 及下游的 mRNA 是否存在镜像调控现象.结果 circAZIN1在hADSC成软骨分化过程中(第3天和第21天)、IL-β及TNF-α构建的软骨细胞炎症模型中差异化表达最明显(第3天组vs.第21天组、对照组vs.IL-β组、对照组vs.TNF-α组);过表达circAZIN1可促进软骨细胞ECM的合成、抑制其分解;RNA-Pull down试验检测到circAZIN1明显结合AGO2蛋白,提示circAZIN1海绵吸附miRNAs的可能性大,进一步数据库预测circAZIN1的下游miRNA为hsa-miR-654-3p,而 hsa-miR-654-3p 的下游 mRNA 为 CACNA1I,最后过表达 hsa-miR-654-3p 后 qPCR 检测证实 circA-ZIN1、hsa-miR-654-3p及CACNA1I间存在镜像调控现象.结论 circAZIN1通过海绵吸附hsa-miR-654-3p继而抑制CACNA1I的沉默效应从而发挥抑制软骨细胞退变的作用,这为circRNA在OA发生、发展中的调控机制研究提供了参考.