长链非编码RNA DPP10-AS1促进甲状腺乳头状癌淋巴结转移的机制研究
Mechanism study of long non-coding RNA DPP10-AS1 promotes lymph node metastasis in papillary thyroid carcinoma
摘要目的 筛选甲状腺乳头状癌(PTC)淋巴结转移相关的长链非编码RNA(lncRNA)并进行体外功能验证,为阐明PTC淋巴结转移的分子机制提供理论基础.方法 采用lncRNA+mRNA芯片检测有和无淋巴结转移PTC组织中差异性表达的lncRNA和mRNA,实时荧光定量PCR(qPCR)验证目标差异性lncRNA.以慢病毒为载体构建目标lncRNA高表达和低表达PTC细胞系,细胞计数试剂盒-8(CCK-8)、细胞划痕、Tran-swell、细胞克隆形成试验分别检测目标lncRNA对PTC细胞增殖、迁移、侵袭及克隆形成的影响.结果 与5例无淋巴结转移PTC组织比较,基因芯片在5例淋巴结转移PTC组织中检测到119个lncRNA和53个mR-NA表达水平上调,263个lncRNA和198个mRNA表达水平下调.进一步选择21个lncRNA在原10例PTC标本中进行验证,结果显示,与无淋巴结转移PTC组织比较,淋巴结转移PTC组织中lncRNA FLJ20444、DPP10-AS1、ENST00000567197 高表达,而 uc021thd.1、LNC00944、ENST00000429730、BLNK 低表达(P<0.05).另外30例新鲜PTC组织qPCR结果显示,与无淋巴结转移PTC组织比较,淋巴结转移PTC组织中DPP10-AS1高表达,LNC00944低表达(P<0.05).细胞功能实验显示DPP10-AS1高表达组细胞增殖、迁移、侵袭及克隆形成能力均高于DPP10-AS1低表达组(P<0.05).结论 lncRNA DPP10-AS1可能通过某些信号通路在PTC转移过程中发挥作用.
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