摘要目的：分析HBV反转录酶（RT）区rtA181S变异与阿德福韦酯（ADV）耐药的相关性。方法应用直接测序法筛选分析大样本慢性HBV感染者rtA181S变异的检出频率，并对1例接受ADV单药治疗失败的慢性乙型肝炎患者血清中HBV RT区基因进行克隆测序，分析相关变异形式。用XhoⅠ和SphⅠ双酶切pGEM-Teasy RT及pTriEx-HBV(C)载体后再连接，构建1.1倍HBV野生株和耐药株的重组质粒，转染人肝癌细胞系HepG2细胞，5 h后分别加入不同浓度的 ADV（0、0.033、0.100、0.330、1.000、3.300μmol/L）。隔天换药，4 d后收集细胞上清，采用实时荧光定量PCR法检测不同药物浓度作用下细胞培养上清中的HBV DNA载量，并分析其表型耐药特点。结果9830例慢性HBV感染者的12000个血清样本中，有46例样本检出rtA181S变异（单独或与其他耐药变异联合出现），在653例中检出经典的rtN236T/A181V变异。其中随访的1例在接受ADV治疗19个月后出现了病毒学和生化学突破，直接测序检出rtA181S+N236T变异，克隆测序分析显示在24个克隆中11个（45.83%）为野生型，6个（25.00%）为rtN236T变异型，5个（20.83%）为rtA181S变异型，1个（4.16%）为rtA181V变异型，1个（4.16%）为rtA181S+N236T变异型。在体外实验中，rtN236T、rtA181S和rtA181S+N236T变异株的相对复制力分别是野生株的91.35%、29.90%和68.53%。表型耐药分析显示rtN236T、rtA181S和rtA181S+N236T变异株对ADV的灵敏性分别为野生株的1/4.41、1/3.05和1/5.43。结论 rtA181S是一种ADV耐药相关变异，可单独或联合其他变异引起患者耐药。但与经典ADV耐药变异相比，rtA181S变异引起的ADV耐药相对较弱，临床检出率较低。