载FGF10的多孔明胶微球对脊髓损伤大鼠的神经修复作用机制研究
Effect of porous gelatin microspheres loaded with FGF10 on nerve repair in rats with spinal cord injuries:mechanism study
摘要目的 探讨载成纤维生长因子10(FGF10)的多孔明胶微球(GMSs)对脊髓损伤大鼠神经保护作用的机制.方法 20只健康雄性SD大鼠(220~250 g)随机分为假手术组、脊髓损伤组、FGF10组、FGF10-GMSs组,每组各5只.假手术组只咬除T9~T10棘突及椎板等骨性组织,不造成脊髓损伤.其余3组造成脊髓损伤后,用Hamilton微量注射器向FGF10组大鼠的损伤注入20μL FGF10,向FGF10-GMSs组大鼠的损伤处注射20μL FGF10负载的多孔明胶微球,脊髓损伤组和假手术组的大鼠注射等量的生理盐水.收集大鼠胸椎(T9~T10)脊髓组织,分别采用离体释放试验评估FGF10-GMSs的持续释放.使用大鼠脊髓损伤评分(BBB评分)和斜坡测试评估FGF10-GMSs对SCI大鼠的运动功能改善效果.使用HE、Nissl染色、TUNEL试验及Western blot评估FGF10-GMSs的治疗效果.结果 离体释放实验结果显示,普通明胶微球会在短时间内迅速释放FGF10,多孔明胶微球持续而缓慢地释放FGF10,未在初始48 h内观察到显著的爆发释放模式.BBB评分结果显示,与脊髓损伤组(5分)相比,第21天FGF10-GMSs组(12分)和FGF10组(9分)的大鼠均表现出良好的运动功能恢复(P<0.05),斜坡测试结果与BBB评分结果一致,FGF10组和FGF10-GMSs组均获得了明显的行为改变.HE、Nissl染色结果显示FGF10-GMSs组内的坏死、核崩解和浸润性多核白细胞数量较少,在脊髓腔内坏死组织的比例显著降低.Western blot测定结果显示FGF10-GMSs组中的细胞凋亡抑制程度比FGF10组中更加明显.TUNEL试验也产生类似的结果,相比FGF10组和脊髓损伤组,FGF10-GMSs组具有更加明显的抑制细胞凋亡的作用.结论 FGF10-GMSs通过抑制神经细胞的凋亡,从而达到保护脊髓损伤大鼠神经细胞的作用,为脊髓损伤的治疗提供新的思路,对提高脊髓损伤的预后具有十分重要的意义.
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