茶树转录因子基因CsDREB-A4的克隆与温度胁迫响应的分析

The Cloning of Transcription Factor Gene CsDREB-A4 and The Response to Temperature Stress in Camellia sinensis

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摘要基于本实验室茶树品种迎霜的转录组数据，通过PCR方法从迎霜的DNA中克隆得到CsDREB-A4基因。分析显示，该基因含开放阅读框长708 bp，编码235个氨基酸，含有 AP2/ERF家族转录因子典型的保守 AP2结合域，并且与大豆、番茄、葡萄、拟南芥等的 DREB 转录因子有高度同源性。从进化树、亲/疏水性、无序化特性、二级和三级结构等方面进行预测与分析，结果表明，该转录因子属于 AP2/ERF家族中的 DREB亚族的 A4组，大多数氨基酸属亲水性氨基酸，无序化特征比较明显，三级结构与 AtERF1相似。利用实时荧光定量 PCR 分析表明，在迎霜、安吉白茶、云南十里香3个茶树品种中 CsDREB-A4基因均受高温、低温诱导表达。在4℃处理下，在上述3个茶树品种中CsDREB-A4基因表达量均在24 h时达到最大值，分别为对照的23、4、43倍，并且 CsDREB-A4基因在迎霜和云南十里香中均比安吉白茶的基因表达上调时间更长，上调程度更大。在38℃处理下，CsDREB-A4基因在迎霜和云南十里香中表达受抑制，均只在8 h时表达量高于对照，而在安吉白茶中表达量显著增加，在12 h时高达对照的2720倍。