一种基于儿茶素的多酚氧化酶交联聚集体制备及其高效催化合成茶黄素-3,3'-双没食子酸酯研究
Preparation of a Cross-linked Polyphenol Oxidase Aggregate Based on Catechins and Its Efficient Catalytic Synthesis of Theaflavin-3,3'-digalate
摘要为了更加高效低成本地制备茶黄素,以儿茶素作为多酚氧化酶蛋白的交联试剂,对巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)来源的多酚氧化酶进行了酶交联聚集体的制备并应用于茶黄素-3,3'-双没食子酸酯的合成.通过对酶交联参数优化以及交联前后的酶催化性能研究,结果表明,在 pH 4.0,EGCG为 0.5 mg·mL-1,多酚氧化酶活性 200 U·mL-1,交联时间 50 min 时,可以获得交联酶的最佳酶活回收率.与游离酶相比,交联酶表现出更优异的催化性能(热稳定性、有机溶剂耐受性、底物耐受性).交联酶被用于合成茶黄素-3,3'-双没食子酸酯时,产物质量浓度可达 800 μg·mL-1,且交联酶能被重复循环使用至少 3 个批次,利用该方法制备茶黄素,可以显著降低酶的应用成本,具有潜在工业化应用价值.
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