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白蛋白/细胞角蛋白19启动子调控的红绿双色荧光蛋白报告载体的构建及其在肝干细胞分化研究中的应用

Construction of DsRed/EGFP expression vectors driven by albumin/cytokeratin 19 promoters and their utilization in monitoring differentiation of liver progenitor cells

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摘要目的:利用报告基因监测肝干细胞的分化走向.方法:通过PCR从小鼠基因组中克隆了细胞角蛋白19启动子片段,构建了细胞角蛋白19启动子调控的绿色荧光蛋白(pCK19 EGFP)和白蛋白启动子调控的红色荧光蛋白报告载体(pAlbDsRed),并利用报告载体标记的肝干细胞(liver epithelial progenitor cells,LEPCs)观察了悬浮培养时LEPCs的分化去向.结果:白蛋白/细胞角蛋白19启动子调控的红绿双色荧光蛋白报告载体可以实时地显示肝原始细胞在不同的诱导环境下的分化走向.结论:双色荧光蛋白报告载体的成功构建为研究LEPCs的分化、筛选可诱导LEPCs定向分化的分子提供了便捷的工具.

作者李文林 ^[1] 苏娟 ^[1] 陶欣荣 ^[1] Joseph T Lau ^[2] 胡以平 ^[1] 学术成果认领

作者单位第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室,上海 200433 ^[1] The Department of Molecular and Cellular Biology,Roswell Park Cancer Institute,Elm and Carlton Streets,Buffalo,NY 14263,USA ^[2]

关键词肝干细胞细胞分化白蛋白细胞角蛋白19 启动子红色荧光蛋白绿色荧光蛋白基因,报告

医学主题词蛋白(Egg White)荧光(Fluorescence)细胞(Cells)肝(Liver)角蛋白19(Keratin-19)

分类号 Q782（分子生物学基因工程《遗传工程》）

栏目名称

专题报道:干细胞研究

DOI 10.3321/j.issn:0258-879X.2005.03.002

发布时间 2005-05-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

基金项目

国家自然科学基金（30470876,30270668,30270603,30200138）上海市科委项目（03DJ14020）