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表达红色荧光蛋白DsRed报告基因的逆转录病毒载体的构建和在肝干细胞体内示踪中的应用

Construction of retroviral vector expressing DsRed and its utilization in tracing transplanted liver progenitor cells in vivo

二维码有效期 120s

摘要目的:建立表达红色荧光蛋白DsRed的逆转录病毒载体,并对肝原始细胞进行体外标记和体内示踪研究.方法:将pDsRedl 1载体中的DsRed片段克隆到逆转录病毒载体pLNCG C1中构建了pLNCG DsRed载体.将该载体导入Phoenix包装细胞,进而采用乒乓转染的方法感染包装细胞PT67,获得高滴度稳定产毒的PT67细胞系.结果:利用PT67细胞系产生的病毒上清可以高效的感染体外培养的肝原始细胞系.将这些DsRed标记的肝原始细胞移植到小鼠损伤肝脏中,4周后可以在再生肝脏中清晰地观察到具有红色荧光的外源细胞.结论:由于肝脏组织没有红色自发荧光,用DsRed标记肝原始细胞进行肝内示踪时背景干扰小.

作者李文林 ^[1] 苏娟 ^[1] 陶欣荣 ^[1] Joseph T Lau ^[2] 胡以平 ^[1] 学术成果认领

作者单位第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室,上海 200433 ^[1] The Department of Molecular and Cellular Biology,Roswell Park Cancer Institute,Elm and Carlton Streets,Buffalo,NY 14263,USA ^[2]

关键词红色荧光蛋白基因,报告逆转录病毒载体肝干细胞

医学主题词肝(Liver)荧光(Fluorescence)病毒(Viruses)蛋白(Egg White)干细胞(Stem Cells)

分类号 Q782（分子生物学基因工程《遗传工程》）

栏目名称

专题报道:干细胞研究

DOI 10.3321/j.issn:0258-879X.2005.03.003

发布时间 2005-05-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

基金项目

国家自然科学基金（30470876,30270668,30270603,30200138）上海市科委项目（03DJ14020）