换一批人白细胞弹性蛋白酶抑制剂体外筛选模型的建立及优化
Optimization research on in vitro screening model for human leukocyte elastase inhibitor
摘要目的 探讨人白细胞弹性蛋白酶(HLE)与其底物反应的最适条件,建立一种高通量的HLE抑制剂体外筛选模型.方法 通过测定反应产物--对硝基苯胺(p-NA)的光密度值,研究电解质浓度、反应温度、反应体系pH值、酶和底物作用浓度、反应时间及检测波长等对酶促反应的影响程度,确定酶与底物反应的最佳条件.结果 确定的最优反应条件为:HLE (0.2 U/ml) 30 μl,底物(50 mmol/L)100 μl,含1.0 mol/L NaCl的Tris缓冲液(pH 7.5),反应温度37℃,反应时间24 h,检测波长为545 nm.结论 建立了一种稳定的HLE抑制剂体外筛选模型,该模型灵敏度高、准确性和重复性强,可用作筛选HLE抑制剂的平台.
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DOI
10.3724/SP.J.1008.2011.00640
发布时间
2011-09-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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