换一批
换一批程序性死亡配体1在索拉非尼耐药肝癌细胞中的表达和功能
Expression and role of programmed cell death ligand-1 in sorafenib-resistant hepatocellular carcinoma cells
摘要目的 探讨程序性死亡配体1(PD-L1)在索拉非尼耐药人肝癌细胞中的表达及其功能.方法 采用浓度递增法构建索拉非尼耐药人肝癌细胞株(Hep3B-SR和HepG2-SR),用CCK-8法检测半数抑制浓度(IC50)并计算耐药指数,蛋白质印迹法和qPCR检测P-糖蛋白(P-gp)、多药耐药相关蛋白1(MRP1)和PD-L1的表达.转染siRNA沉默耐药细胞PD-L1的表达并检测沉默效率.沉默PD-L1表达后,CCK-8法检测IC50、计算耐药指数,并检测耐药基因的表达,用细胞增殖实验检测细胞增殖情况,划痕实验检测细胞迁移情况,平板克隆形成实验检测细胞克隆形成情况,流式细胞术检测细胞凋亡情况.结果 Hep3B-SR和HepG2-SR的耐药指数分别为5.4和5.2.耐药细胞中P-gp、MRP1和PD-L1表达较亲本细胞上调(P均<0.01).沉默PD-L1表达后,Hep3B-SR和HepG2-SR的耐药指数分别下降为1.8和1.5,P-gp和MRP1的表达下调(P均<0.01);沉默PD-L1表达可抑制耐药细胞的增殖、迁移、克隆形成并促进其凋亡(P均<0.01),合用索拉非尼时作用更为显著.结论 PD-L1在索拉非尼耐药人肝癌细胞中高表达;抑制PD-L1表达可部分逆转索拉非尼耐药人肝癌细胞的耐药性,提高索拉非尼的抗癌效果;抑制PD-L1表达可有效抑制索拉非尼耐药人肝癌细胞的生长,合用索拉非尼其抗癌效果更强.
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关键词
肝细胞癌程序性死亡配体1索拉非尼耐药性基因沉默liver cell carcinomaprogrammed cell death ligand-1sorafenibdrug resistancegene silencing
栏目名称
DOI
10.16781/j.0258-879x.2018.02.0152
发布时间
2018-03-21
基金项目
国家自然科学基金（81101634）；
四川省科技厅科技支撑计划项目（2015FZ0073）；
四川省科技厅重点研发项目（2017SZ0066）；
四川省卫计委科研课题(16PJ026).Supported by National Natural Science Foundation of China（81101634）；
Scientific and Technological Supporting Project of Science & Technology Department of Sichuan Province（2015FZ0073）；
Key Research and Development Project of Science & Technology Department of Sichuan Province（2017SZ0066）；
Scientific Research Project of Health and Family Planning Commision of Sichuan Province（16PJ026）
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