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间接ELISA法测定转基因小鼠血清中核糖核酸酶抑制因子的表达

Expression of ribonuclease inhibitor in blood serum of RI gene infected mice by indirect ELISA technique

摘要[目的] 建立间接ELISA法测定血清中核糖核酸酶抑制因子(ribonuclease inhibitor,RI)含量的方法,并测定在转RI基因小鼠血清中RI的表达情况.[方法] 用血清样品包被酶标板,兔抗人 RI抗体为一抗,辣根过氧化物酶标记的羊抗兔IgG为二抗,建立血清RI定量检测的间接ELISA法;取转染了RI基因的小鼠的血清,用上述建立的间接ELISA法测定不同时相小鼠血清中RI的表达水平.[结果] 定量检测血清RI的间接ELISA法最适反应条件为一抗最佳稀释度为1∶4000,二抗的最佳稀释浓度为1∶2000.转基因小鼠第2、3周血清中RI含量较低(0.556±0.080),1个月左右达到最高值(0.836±0.113),3个月时明显下降(0.640±0.100).[结论] 间接ELISA法可以用于测定血清中的RI抗原含量.

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