换一批荧光原位杂交法检测环境硝化细菌实验条件优化及应用
Optimization and application of fluorescence in situ hybridization assay for detecting nitrifying bacteria in environmental samples
摘要通过正交试验筛检荧光原位杂交(FISH)技术在检测环境中硝化细菌时的最佳及适合的实验条件.结果显示,样品预处理较优的条件为:热固定2h,乙醇脱水3min;FISH技术检测环境样本中亚硝化细菌的最佳实验条件为:杂交温度46℃,杂交时间3h,洗脱液中NaCl浓度20mmol/L;检测硝酸菌最佳实验条件为:杂交温度46℃,杂交时间5 h,洗脱液中NaCl浓度60 mmol/L.应用该方案对太湖、玄武湖、南京锁金村污水处理厂活性污泥中硝化细菌分布进行分析,结果显示,环境样本中亚硝化细菌和硝酸菌含量分别是:太湖1.68×103, 0.54×103cells/mL;玄武湖1.34×103, 0.38×103cells/mL;锁金村污水处理厂活性污泥8.30×106, 0.52×106cells/g.FISH技术检测环境样品中硝化细菌与传统检测方法相比具有快速、简便、准确的优点,在研究环境微生物方面有较好的应用前景.
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