换一批
换一批乌拉尔甘草GubHLH基因克隆与原核表达
Cloning and Prokaryotic Expression of GubHLH Gene in Glycyrrhiza Uralensis Fisch
摘要目的 构建乌拉尔甘草基本螺旋-环-螺旋(GubHLH)转录因子的原核表达载体并进行原核表达及鉴定.方法 从乌拉尔甘草根中提取总mRNA,反转录得到cDNA后PCR扩增获得GubHLH基因全长,构建原核表达载体pET28a-GubHLH,分析Gub-HLH表达的最佳IPTG浓度、温度和时间条件.结果 获得的重组质粒pET28a-GubHLH在大肠杆菌E.coli BL21(DE3)中的最佳诱导条件为37℃下用0.2 mmol/L的IPTG诱导目的蛋白3h.结论 成功构建GubHLH蛋白原核表达体系,并获得重组质粒pET28a-GubHLH在大肠杆菌E.coli BL21(DE3)中的最佳诱导条件.
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