换一批
换一批人脑恶性胶质瘤微血管内皮细胞的分离培养与体外血管生成特性
Isolation, culture, and in vitro angiogenic characteristics of microvascular endothelial cells from human malignant glioma
摘要目的建立人脑恶性胶质瘤微血管内皮细胞(glioma-derived microvascular endothelial cells, GDMEC)体外培养体系并观察其体外毛细血管样结构形成特性.方法采用胰酶、胶原酶联合消化法分离人脑恶性胶质瘤微血管片段,利用结合CD105抗体的MACS MicroBeads免疫磁珠内皮细胞分选系统纯化GDMEC;应用光镜、透射电镜和免疫细胞化学等技术对所获得的GDMEC进行鉴定;采用三维培养模型,观察GDMEC受血管内皮生长因子(VEGF)诱导下的小管样结构(TLS)形成的特性.结果所获GDMEC呈FⅧ-RAg阳性,细胞纯度可达98%;电镜下见Weibel-Palade小体;生长状态良好、可传代培养.这些细胞对VEGF刺激具有良好的反应性,体外易于形成TLS.结论本研究摸索并建立了人脑GDMEC的分离培养方法,所获GDMEC对肿瘤血管生成研究具有重要价值.
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