换一批
换一批摘要目的构建人糖皮质激素受体变异体表达载体,研究其表达和功能.方法运用RT-nested PCR扩增糖皮质激素受体不含有编码LBD(ligand binding domain)的cDNA序列,将PCR产物定向克隆至pEGFP-N2质粒载体,测序筛选重组质粒;荧光显微镜观察重组质粒转染表达情况;相对荧光素酶法检测GR转录激活活性.结果扩增出长1 601 bp的cDNA序列,测序证实:克隆片段与Genbank该基因序列同源性为100%;重组质粒表达产物定位于细胞核;转染组细胞转录激活活性增强.结论成功构建糖皮质激素受体变异体的表达载体,该变异体具有不依赖激素的转录激活活性.
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主题词
受体, 糖皮质激素(Receptors, Glucocorticoid)转录激活(Transcriptional Activation)人(Persons)研究(Research)质粒(Plasmids)
栏目名称
基础医学
DOI
10.3321/j.issn:1000-5404.2006.01.018
发布时间
2006-03-23
基金项目
中国科学院资助项目
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