人源脂多糖结合蛋白单克隆抗体的筛选及初步鉴定
Screening and identification of phage antibodies against human lipopolysaccharide binding protein
摘要目的制备人源抗脂多糖结合蛋白(LBP)单克隆抗体,并对该抗体的效价进行初步鉴定.方法以人脂多糖结合蛋白(human lipopolysaccharide binding protein,hLBP)为抗原,以人源噬菌体抗体库进行筛选,经5轮"吸附-洗脱-扩增"的富集反应后,筛选出3株抗人LBP阳性克隆株,抽提其质粒、切除geneⅢ、自身环化并电转入XL1-blue后,以IPTG诱导分泌表达可溶性抗体,通过ELISA法测定抗体效价.结果抗体库被浓缩8.16×104倍,获得3个与LBP结合能力较强的单克隆菌株,其中结合力最强者产生抗体活性为106.结论成功获得针对人LBP的Fab抗体,经初步鉴定具有较高效价,为下一步研究该抗体功能奠定基础.
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