换一批人MCHR2真核表达载体的构建及稳定转染CHO细胞系的建立
Construction of eukaryotic expression vector of human MCHR2 and establishment of its stable transfected CHO cell line
摘要目的 构建人MCHR2真核表达载体,转染CHO细胞,建立稳定转染的CHO细胞系.方法 采用PCR方法,以人胎脑cDNA文库为模板扩增人MCHR2基因的全长cDNA编码区序列,利用DNA重组技术将其定向插入到真核表达载体pcDNA3.1(+),经酶切和测序鉴定后,用脂质体转染法转染CHO细胞,通过G418筛选,建立稳定转染的CHO细胞系,用RT-PCR、Western blot及免疫荧光法检测MCHR2的表达.结果 成功构建了pcDNA3.1(+)/MCHR2真核表达载体,并建立了稳定转染的CHO细胞系,成功地表达目的基因.结论 真核表达载体成功构建和稳定转染CHO细胞系的建立为进一步研究MCHR2的功能奠定良好的实验基础.
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DOI
10.3321/j.issn:1000-5404.2007.01.010
发布时间
2007-02-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家自然科学基金（30671008）
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