换一批
换一批摘要目的 构建pGEX4T-1-RGS4载体,并检测融合蛋白GST-RSG4在原核中的表达水平.方法 采用RT-PCR方法 ,将克隆SD大鼠G蛋白信号转导调节因子(regulator of G protein signaling 4,RGS4)基因全长编码区的cDNA连接到原核表达载体pGEX4T-1中,IPTG诱导原核表达,通过Western blot检测融合蛋白GST-RSG4的表达水平.结果成功构建了pGEX4T-1-RGS4载体;经IPTG的诱导,RGS4可与GST以融合蛋白的形式高效表达.pGEX4T-1-RGS4在原核内表达产物相对分子质量约为50×103,与预期融合蛋白大小一致.结论 构建的重组质粒能够在大肠杆菌中高效表达.
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栏目名称
基础医学
DOI
10.3321/j.issn:1000-5404.2007.23.007
发布时间
2008-04-07
基金项目
国家自然科学基金
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