换一批
换一批中国恒河猴Mamu-B*1703/EGFP在K562和B16细胞中的表达及分布
Expression and distribution of Chinese rhesus macaque Mamu-B*1703/EGFP in K562 and B16 cells
摘要目的 分析恒河猴主要组织相容性复合体(major histocompatibility complex,MHC)Ⅰ类分子重链的亚细胞分布,建立适于体外研究恒河猴MHCⅠ类分子表达和抗原呈递功能的细胞系.方法 将含Mamu-B*1703重链基因真核表达载体pEGFP-N1分别转染K562和B16细胞,细胞收集后以W6/32单克隆抗体或抗Mamu-B*1703抗血清及PE标记二抗染色,利用激光共聚焦显微镜和流式细胞术分析Mamu-B*1703复合体在细胞内和细胞表面的表达.结果 在K562和B16细胞的细胞质内均可观察到与Mamu-B*1703重链基因融合表达的绿色荧光蛋白激发后的绿色荧光,即2种细胞均可表达外源Mamu-B*1703重链分子;但通过藻红蛋白标记的抗MHC Ⅰ类分子复合体抗体染色显示,Mamu-B*1703复合体仅表达于K562细胞表面,而不表达于B16细胞表面.结论 Mamu-B*1703重链可与人K562细胞而不能与小鼠B16细胞内的β2m轻链结合组装成复合体,表达于细胞表面,提示研究恒河猴的MHC Ⅰ分子表达应利用人类的细胞株.
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2010-06-12
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