电磁辐射对原代培养的皮层神经元中tau蛋白磷酸化的影响

Effect of electromagnetic radiation on tau protein phosphorylation in primarily cultured cortical neurons

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摘要目的研究电磁辐射对原代培养皮层神经元tau蛋白磷酸化的影响.方法原代培养大鼠皮层神经元分为假辐照组和辐照组,辐照组采用平均功率密度为90 mW/cm2的电磁波辐照10 min,分别于辐照后0、1、3、6、12 h取材.采用CCK-8检测电磁辐射辐照后神经元活性,Western blot检测tau蛋白磷酸化位点ser199/202、ser396、ser404磷酸化变化,同时观察细胞周期素依赖性蛋白激酶5(cyclin dependent kinase 5,CDK5)抑制剂Roscovitine、糖原合成激酶-3β(glycogen synthase kinase-3β,GSK-3β)抑制剂氯化锂(LiCl)和钙激活蛋白酶(calpain)抑制剂PD150606对电磁辐射暴露后tau蛋白磷酸化水平的影响.结果电磁辐射辐照后6h和12 h,原代培养大鼠皮层神经元细胞活性明显降低[与假辐照组比较,分别下降19％ (P ＜0.05)和30％ (P ＜0.01)].电磁辐射辐照后1h和3h,原代培养大鼠皮层神经元tau蛋白ser404位点磷酸化程度一过性增强[与假辐照组比较,分别升高89％(P＜0.01)和46％(P＜0.05)],而ser199/202、ser396位点磷酸化程度变化不明显(P＞0.05).Roscovitine、LiCl和PD150606对电磁辐射引起的tau蛋白ser404位点过度磷酸化有显著抑制作用(P＜0.01).结论电磁辐射可引起原代培养的皮层神经元tau蛋白ser404位点过度磷酸化,CDK5、GSK-3β和calpain参与其中.