微摩尔浓度铜离子通过刺激活性氧产生促进人角质形成细胞增殖

Micromolar concentration of copper (ii) ions enhances proliferation in human skin keratinocyte through appropriating generation of reactive oxygen species

导出 OA 学术成果认领

摘要目的观察不同浓度Cu2+对人角质形成细胞株(HaCaT)增殖活性及细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平的影响,用活性氧清除剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)验证两者之间的关系.方法不同浓度Cu2+(0、10-8、10-7、10-6、10-5、10-4、10-3 mol/L)组或(和)5 mmol/L NAC处理HaCaT细胞后,采用CCK-8法和DCFH-DA分别检测细胞的增殖活性和细胞内ROS产生,共聚焦显微镜观察细胞内ROS产生及其与线粒体的分布情况.结果与阴性对照组(0 mol/L Cu2+)相比,10-6、10-5 mol/L组Cu2+处理48 h后HaCaT细胞相对增殖率分别升高至116.19％ (P =0.027)、113.37％(P =0.036),而其细胞内ROS产生在处理后30 min达到127.47％ (P =0.001)、124.28％ (P =0.031),60 min进一步上升至140.47％ (P =0.002)、134.29％ (P =0.007).5 mmol/L NAC能拮抗微摩尔浓度Cu2+的上述作用.虽然10-8、10-7 mol/L Cu2+在处理后60 min也刺激细胞内ROS产生明显升高至110.99％ (P =0.016)及117.34％ (P =0.016),但是处理48 h后细胞相对增殖率仅为101.09％和101.86％,并无促进细胞增殖的效应(P＞0.05).结论微摩尔浓度Cu2+能促进人角质形成细胞增殖,这种促增殖效应可能与刺激细胞内ROS水平的适度上调有关.