换一批神经干细胞与大鼠RPE细胞间的线粒体转运及对RPE细胞凋亡的影响
Mitochondrial transfer from neural stem cells rescues apoptosis of retinal pigment epithelial cells isolated from RCS rats
摘要目的 研究小鼠神经干细胞(neural stem cells, NSCs)C17.2细胞系与从RCS大鼠变性视网膜中原代分离视网膜色素上皮细胞(retinal pigment epithelial,RPE)的线粒体交换方式及其对RPE细胞特性的影响.方法 分离RCS大鼠RPE细胞并进行培养和鉴定.分别用线粒体特异性标记物Mitotracker-red和Mitotracker-green标记RPE细胞和小鼠NSCs细胞的线粒体,将两种细胞共培养,激光共聚焦显微镜下观察两种细胞之间隧道纳米管(tunneling nanotubes,TNT)的形成及线粒体转运方式.采用流式细胞仪检测与NSCs共培养后RPE细胞的反应性活性氧类(reactive oxygen species,ROS)水平、细胞周期和细胞凋亡水平的变化.结果 来源于RCS大鼠视网膜的第3代RPE细胞生长状态良好,RPE65及Bestrophin蛋白阳性率细胞均大于95%.与NSCs共培养24 h后,可见RPE细胞与NSCs间TNT的形成,NSCs中的线粒体向RPE细胞方向单向运动,接受NSCs转运的线粒体后,RPE细胞的ROS水平降低(P<0.01);RPE细胞的增殖能力增加,处于S期的细胞比例明显增加(P<0.01),细胞增殖指数(PI)显著增加(P<0.05);RPE细胞早期凋亡细胞比例显著降低(P<0.05).结论 NSCs可通过与相邻的变性RPE细胞之间形成TNT并向其转运线粒体而改善变性RPE细胞的存活.
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关键词
干细胞视网膜色素变性视网膜色素上皮线粒体隧道纳米管stem cellsretinitis pigmentosaretinal pigment epitheliummitochondriatunneling nanotubes
栏目名称
DOI
10.16016/j.1000-5404.201701031
发布时间
2017-06-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家重点基础研究发展计划 （(973计划,2013CB967002)）
National Basic Research Program （(973 Program, 2013CB967002)）
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